人基質(zhì)蛋白酶2(MMP-2)類血紅素結(jié)構(gòu)域原核表達優(yōu)化

用構(gòu)建的人基質(zhì)蛋白酶-2(MMP-2)類血紅素結(jié)構(gòu)域原核表達載體PET25b-PEX轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),篩選陽性菌落LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng),異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達產(chǎn)生的表達蛋白,大小約29 kD,與預(yù)期大小相符.設(shè)置不同的IPTG誘導(dǎo)終濃度,誘導(dǎo)時間,誘導(dǎo)時菌液OD值和LB液體培養(yǎng)基的pH值,SDS-PAGE電泳和軟件分析發(fā)現(xiàn),當(dāng)IPTG濃度為0.7 mmol/L,誘導(dǎo)4 h,誘導(dǎo)時菌液OD值為0.7時,實驗?zāi)塬@得最高的PEX蛋白表達;5 L大規(guī)模培養(yǎng)時,LB培養(yǎng)基pH值為7.5時,可獲得較高的重組PEX蛋白表達.

作 者： 李彥杰 王保莉 張守濤 郭藹光 LI Yan-jie WANG Bao-li ZHANG Shou-tao GUO Ai-guang   作者單位： 西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,陜西楊凌,712100  刊 名： 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA  年，卷(期)： 2006 15(2)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： 人基質(zhì)金屬蛋白酶-2   類血紅素結(jié)構(gòu)域   抑制血管生成   優(yōu)化表達  

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