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TGF-β1基因轉(zhuǎn)染大鼠脂肪干細胞向軟骨細胞分化的實驗研究
目的 TGF-β1基因轉(zhuǎn)染大鼠的ADSCs(adipose stromal cells,ADSCs),誘導(dǎo)其向軟骨細胞分化,為軟骨組織工程學(xué)種子細胞提供新方法 .方法 分離、培養(yǎng)大鼠的ADSCs,免疫熒光法進行鑒定;TGF-β1基因轉(zhuǎn)染ADSCs,對轉(zhuǎn)染后細胞進行篩選;MTT法測定篩選后細胞的增殖活性;RT-PCR、Western blot對篩選后細胞的表達進行檢測.結(jié)果 成功分離、培養(yǎng)大鼠的ADSCs;細胞表面標志物CD29和CD44表達陽性,CD106和CD34表達陰性;基因轉(zhuǎn)染后細胞的增殖力變強;轉(zhuǎn)染TGF-β1的ADSCs在目的基因TGF-β1、SOX9、Aggrecan、Collagen II Mrna的表達和軟骨特異性基質(zhì)-Collagen II的分泌增強,明顯高于對照組和轉(zhuǎn)染空載體組;結(jié)果 TGF-β1基因轉(zhuǎn)染后ADSCs具有了軟骨細胞的表型特征,可以用作軟骨組織工程的種子細胞.
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