重組羧肽酶B及其包涵體溶解性的研究

目的 構(gòu)建重組羧肽酶B(rCPB)的表達質(zhì)粒和表達菌株,表達羧肽酶B(CPB),并對表達CPB包涵體的溶解性進行研究.方法 構(gòu)建CPB重組質(zhì)粒pET-21a-CPB,將其導入表達菌株BL21(DE3)中,分別在25℃和37℃進行誘導表達;所得包涵體分別用不同濃度尿素添加不同還原劑溶解,以溶液中的蛋白質(zhì)濃度判定其溶解性,利用非還原SDS-PAGE分析其溶解性提高的原因.結(jié)果 誘導后生長溫度不同對rCPB包涵體的純度及后期處理均有影響;rCPB包涵體在10 mol/L尿素溶液中的溶解度比在8 mol/L尿素溶液中提高2～3倍;添加0.75%β-巰基乙醇能顯著改善rCPB包涵體的溶解效果.經(jīng)非還原SDS-PAGE分析,添加β-巰基乙醇后,溶解rCPB聚體的含量減少.結(jié)論 成功地表達了rCPB,并通過實驗提高了rCPB包涵體的溶解度.

作 者： 安宇 李節(jié) 李素霞 趙健 范立強 袁勤生 AN Yu LI Jie LI Su-xia ZHAO Jian FAN Li-qiang YUAN Qin-sheng   作者單位： 華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室,上海,200237  刊 名： 食品與藥品A  ISTIC 英文刊名： FOOD AND DRUG  年，卷(期)： 2007 9(10)  分類號： Q556  關鍵詞： 重組羧肽酶B   包涵體   變性   還原變性  

【重組羧肽酶B及其包涵體溶解性的研究】相關文章：

重組包涵體的純化與復性04-26

GST-GnRH/TRS融合蛋白(包涵體)的分離、純化與復性研究04-30

HCMV截短UL83基因真核表達重組體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)染及其免疫效力研究04-27

18SrRNA前體的加工及其在植物中的研究現(xiàn)狀04-29

長效重組藥物研究進展04-26

金黃色葡萄球菌外毒素B特異性適體的篩選及其應用04-27

礦山資源環(huán)境一體化思想框架及其應用研究04-30

謝邦杰教授對體上矩陣理論研究的貢獻及其在中國的進展04-29

人工自然及其演化研究04-26

語言意義及其認知研究04-28